试验设计 采用特异性无病原体的雌性Lewis大鼠（175~200 g）作为试验研究对象，第一组试验，将大鼠随机分为3组，Sham chow组（假手术对照组，n=10）、PG/PS chow组（结肠炎组，n=29）和SAZ组（在诱导结肠炎后立即在其饮水中给予柳氮磺吡啶（SAZ）的组（100 mg/kg/d，n=8），通过注射纯化肽聚糖-多糖（PG/PS）诱导结肠炎；第二组试验，将大鼠随机分为6组，Control（No PG/PS）组（喂食对照饮食的假手术组，n=7）、Chow组（喂食饲料的结肠炎组n=29），以及喂食肠内饮食的四个结肠炎组，如表1和表2所示，Control组（肠内饮食，n=7）、Fish Oil组（补充FO的肠内饮食，n=8）、FOS组（补充FOS的肠内饮食，n=8）和XOS组（补充XOS的肠内饮食，n=8）。所有大鼠在结肠炎诱导前接受1周饲喂，随后再接受3周饲料或肠内配方。实验为期4周，包括诱导前和注射后。日采食量和体重每24小时记录一次。标准大鼠实验室饲料包括22%的蛋白质、5%的脂肪和4.5%的纤维。
麻醉后切开气管，插管右股动脉，记录动脉压和取血，右股静脉插管注射同位素标记物，用51铬标记的乙二胺四乙酸（51Cr-EDTA）的血液到腔内的清除率确定粘膜渗透性。测定粘膜渗透性后，大鼠安乐死，切除降结肠并纵向打开，记录灌注段长度和重量，切片并保存组织，用于组织学、干湿比和髓过氧化物酶（MPO）的测定。记录肝脏和脾脏重量；记录结肠标本的湿重，及80℃处理48 h后的干重；取远端结肠、肝脏和脾脏进行组织学分析，并测定结肠MPO活性。 试验结果 （1）SAZ对PG/PS诱导炎症的影响 如表3所示，诱导结肠炎后立即口服SAZ，可显著减弱MPO活性的增强，但结肠重量和粘膜渗透性无显著变化，表明SAZ可抑制粒细胞浸润。SAZ治疗减轻PG/PS引起的肝脏和脾脏重量增加，表明SAZ抑制了肉芽肿性炎症和坏死。
（2）结肠组织学分析 如图1所示，PG/PS处理3周后，出现大量炎症细胞浸润和粘膜下肉芽肿的形成，肠间质表现出广泛的纤维化，导致肠壁增厚，并失去清晰的肌层；与结肠炎动物组相比，SAZ治疗抑制了白细胞浸润；与结肠炎动物组相比，补充XOS动物组的粘膜和粘膜下层组织正常，炎症细胞的数量很少或没有增加。  （3）饮食对PG/PS诱导的结肠干重的影响 如图2所示，与Chow组相比，XOS组显著减弱了PG/PS诱导的结肠重量增加，并与Control（No PG/PS）组相当。
（4）饮食对PG/PS诱导的结肠MPO活性的影响 如图3所示，与Chow组相比，XOS组显著减弱了PG/PS引起的结肠MPO活性增加。
（4）饮食对PG/PS诱导的肝脏和脾脏重量的影响 如表4所示，与Chow组相比，XOS组显著降低了PG/PS引起的肝脏重量增加。  试验结论 本文研究了益生元低聚木糖（XOS）对肽聚糖-多糖（PG/PS）诱导的特异性无病原体的雌性Lewis大鼠的结肠炎的影响，结肠组织学分析表明，补充XOS可抑制炎症细胞产生，与结肠炎动物相比，XOS显著减弱了PG/PS诱导的结肠重量增加、结肠髓过氧化物酶（MPO）活性增加和肝脏重量增加，表现出与已知抗炎药物柳氮磺吡啶（SAZ）类似的抗炎活性。以上结果表明，补充XOS的肠内饮食可通过抑制炎症细胞产生，降低结肠重量、结肠MPO活性和肝脏重量，减轻大鼠慢性结肠炎。 参考资料： Grisham M B, Demichele S J, Garleb K A, et al. Sulfasalazine or enteral diets containing fish oil or oligosaccharides attenuate chronic colitis in rats[J].Inflammatory Bowel Diseases, 1996, 2(3):178-188. |
