试验设计

试验材料：变异链球菌BNCC186308；蔗糖培养基；低聚木糖培养基：以低聚木糖代替蔗糖添加到培养基中，低聚木糖浓度为2%，其余成分同蔗糖培养基；低聚木糖-蔗糖培养基：在蔗糖培养基中添加低聚木糖，使低聚木糖浓度为2%。将上述3种培养基充分溶解后，调节培养基pH值至7.6，高压蒸汽灭菌锅121℃灭菌20 min。

变异链球菌培养和菌悬液的制备：在洁净工作台内，接种活化后的变异链球菌至蔗糖液体培养基内，在37℃厌氧培养罐中培养48 h，利用一次性接种环取少量菌液接种在含蔗糖琼脂培养基上，在37℃厌氧培养罐中培养48 h，再挑取单个菌落至蔗糖液体培养基内，在 37℃厌氧培养罐中培养24 h，在分光光度计上测600 nm处的吸光度为1.3，此菌液即为本实验所需的工作菌悬液。

变异链球菌在3种培养基内的生长、产酸情况的比较：取上述3种类型的液体培养基于试管中，每种类型各10支试管，每支试管各移取5 mL液体培养基，每支试管接种0.1 mL 变异链球菌菌悬液，在37℃厌氧培养罐中培养24 h，用分光光度计测量OD₍₆₀₀₎值，用pH计测量培养基的pH值。

表1为变异链球菌在蔗糖、低聚木糖-蔗糖、低聚木糖3 种液体培养基中培养24 h 后的OD₍₆₀₀₎值，结果显示低聚木糖培养基OD₍₆₀₀₎值明显低于其他两种培养基，说明低聚木糖对变异链球菌的生长产生抑制作用，低聚木糖-蔗糖培养基的OD₍₆₀₀₎值低于蔗糖培养基，说明低聚木糖对蔗糖培养基中的变异链球菌的生长也产生抑制作用。

表2为变异链球菌在蔗糖、低聚木糖-蔗糖、低聚木糖液体培养基中培养24 h后的pH值；pH值即酸度水平，细菌代谢过程中会产生酸性物质，pH值越低代表糖代谢越充分；结果显示低聚木糖培养基pH值高于其他两组，低聚木糖-蔗糖培养基pH值高于蔗糖培养基，说明低聚木糖对变异链球菌的生长代谢产生抑制作用，同时低聚木糖对蔗糖培养基中变异链球菌的生长也产生抑制作用。

本文对3种培养基中变异链球菌的生长和产酸情况进行研究，通过模拟口腔环境厌氧培养24 h后，用分光光度计和pH计分别测定3种培养基中的OD₍₆₀₀₎值和pH值，验证低聚木糖对口腔变异链球菌的抗龋齿作用，结果表明低聚木糖能使变异链球菌的生长和产酸受到明显抑制，低聚木糖-蔗糖培养基也会使变异链球菌的生长和产酸能力下降，因此低聚木糖可作为一种新型防龋齿添加剂。

参考资料：