试验设计 研究对象:以健康清洁级雄性昆明小鼠100只(体重18~21g)和健康清洁级BALB/c雄性小鼠50只(体重18~21g)为研究对象。 小肠运动实验:50只昆明小鼠适应性喂养5d后,按照体重将小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、低聚木糖0.16g/kg剂量组、低聚木糖0.6g/kg剂量组、低聚木糖1.0g/kg剂量组共5组,每组10只小鼠,饲养于室温(25+2)℃,相对湿度55%+5%的动物房,期间可自由获取食物和饮水;灌胃14d后,各组小鼠禁食16h(期间自由饮水);模型对照组和不同剂量低聚木糖组灌胃给予0.25g/L复方地芬诺酯,正常对照组给予蒸馏水(灌胃量为20mL/kg), 30min后各受试物实验组小鼠灌胃含相应剂量受试物的阿拉伯胶墨汁悬液,正常对照组和模型对照组灌胃给予空白阿拉伯胶墨汁(小鼠灌胃量为20mL/kg);25min后,脱颈椎处死动物,打开腹腔分离肠系膜,剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管,轻轻将小肠拉成直线,测量肠管长度为“小肠总长度”,从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”,计算墨汁推进率如下:推进率(%)=墨水移动距离(cm)/小肠全长(cm)x100。 排便试验:50只昆明小鼠适应性喂养5d后,按照体重将小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、低聚木糖0.6g/kg剂量组、低聚木糖1.0g/kg剂量组、低聚木糖2.0g/kg剂量组共5组,每组10只小鼠,灌胃给予相应的受试物;灌胃14d后,将各组小鼠禁食16h (期间自由饮水);模型对照组和各受试物实验组灌胃给予0.50g/L复方地芬诺酯,正常对照组给予蒸馏水(灌胃量为20mL/kg),30min后各受试物实验组小鼠灌胃给予含相应剂量受试物的阿拉伯胶墨汁悬液,正常对照组和模型对照组灌胃给予空白阿拉伯胶墨汁悬液(小鼠灌胃量为20mL/kg);动物均单笼饲养,正常饮水进食,从灌胃阿拉伯胶墨汁悬液起开始计时,记录每只动物排首粒黑便时间、5h内自排出首粒黑便后的粪便粒数及重量。 调节肠道菌群功能实验:50只BALB/c小鼠,按照体重将小鼠随机分为正常对照组、低聚木糖0.6g/kg剂量组、低聚木糖1.0g/kg剂量组、低聚木糖2.0g/kg剂量组共4组,每组10只小鼠;给予受试物前及14d后,无菌采取小鼠粪便(约0.1g),进行肠道双歧杆菌、乳杆菌、肠球菌、肠杆菌的检测。 试验结果 (1)低聚木糖对小鼠小肠运动功能的影响 由表1可知,模型对照组小鼠的墨汁推进率显著低于正常对照组的墨汁推进率(p<0.01),即小鼠肠蠕动抑制模型成立;与模型对照组相比,0.16g/kg、0.6g/kg、1.0g/kg低聚木糖剂量组的墨汁推进率均未出现显著性差异(p>0.05)。
(2)低聚木糖对小鼠小肠排便功能的影响 由图1可知,模型对照组小鼠的首粒黑便时间较正常对照组显著推迟(p<0.05),排便粒数及排便重量较正常对照组显著降低(p<0.05),便秘模型成立。1.0g/kg和2.0g/kg低聚木糖组对便秘小鼠的首粒黑便时间、排便粒数和排便重量均有显著影响(p<0.05);与模型对照组相比,1.0g/kg组小鼠的首粒黑便时间提早了21.3%,排便重量和粒数分别增加了133.3%和183.3%; 2.0g/kg组小鼠的首粒黑便时间提早了22.7%,排便重量和排便粒数分别增加了122.2%和125.0%;在本次实验中,0.6g/kg低聚木糖剂量组小鼠的首粒黑便时间、排便粒数、排便重量与模型组相比未发现显著性的变化。
(3)低聚木糖对小鼠肠道菌群的影响 由表2可知,与实验前比较,正常对照组小鼠肠道内的双歧杆菌和乳杆菌数量对数值在实验前后未出现显著变化(p>0.05);在摄入低聚木糖14d后,小鼠肠道内的双歧杆菌及乳杆菌数量对数值较实验前明显增加(p<0.01);与正常对照组相比,摄入低聚木糖14d后小鼠肠道内双歧杆菌及乳杆菌数量对数值均显著高于正常对照组(p<0.01),肠杆菌和肠球菌的数量对数值未见显著性变化;实验前后各组小鼠肠道内的肠杆菌数量对数值未有显著变化(p>0.05) ,小鼠肠道内肠球菌数量对数值较实验前增加,但其增加幅度远远低于双歧杆菌及乳杆菌增加幅度。 试验结论 低聚木糖剂量组的小鼠小肠推进率均与模型对照组小鼠无显著性差异;排便实验中低聚木糖1.0、2.0g/kg剂量组小鼠首粒黑便时间、5h排便粒数及5h排便质量均与模型对照组具有显著性差异;低聚木糖干预后,小鼠肠道内双歧杆菌及乳杆菌数量较干预前显著增加,并与对照组形成显著性差异;本研究验证了低聚木糖具有润肠通便和调节肠道菌群的功效。
参考资料: 王鑫,朱婧,刘静,肖林,孙忠伟,陈小刚,李东.低聚木糖润肠通便及调节肠道菌群功能的研究[J].食品工业科技,2015,36(14):359-362. |