试验设计 菌株 长双歧杆菌（Bifidobacterium longum 1.2186）、青春双歧杆菌（Bifidobacterium adolescentis 1.2190）、婴 儿 双 歧 杆 菌 （ Bifidobacterium infantis 1.1853）、植 物 乳 杆 菌 （ Lactobacillus plantarum 1.557）均购自中国普通微生物菌种保藏管理中心；鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus 6133）购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。 菌株的活化培养 取48 h乳杆菌及双歧杆菌培养物，按5%的比例分别转接至新鲜的MＲS和BS液体培养基中，37℃厌氧培养24 h，取出于4℃冰箱保存备用。 低聚木糖对乳杆菌生长的影响 在MＲS培养基中分别加入0、0.2%、0.5%、1%低聚木糖，分为四组，其中不加低聚木糖的作为对照组，每组做三个重复，分装于100 mL 输液瓶中，121℃灭菌30 min，分别加入已培养好的2种乳杆菌菌液2 mL，37℃厌氧培养24 h后取出，测活菌数（平板计数法）。 低聚木糖对双歧杆菌生长的影响 在BS培养基中分别加入0、0.2%、0.5%、1%低聚木糖，分为四组，其中不加低聚木糖的作为对照组，每组做三个重复，分装于100 mL 输液瓶中，121℃灭菌30 min，分别加入已培养好的3种双歧杆菌菌液2 mL，37℃厌氧培养24 h后取出，测活菌数（平板计数法）。 低聚木糖对人体肠道菌群的影响 采用GAM培养基为基础培养基（未加葡萄糖），对照组1加1%葡萄糖，对照组2不加葡萄糖，试验组加0.5%低聚木糖。每组设3个平行样，每个样装250 mL，共计分装9个100 mL输液瓶。加塞并插上针头，然后115℃灭菌20 min，灭菌后拔出针头。取新鲜粪便10 g加入100 mL稀释液中充分混合，分别取上清液1 mL加入9个样品中培养，37℃ 发酵。检测发酵0、6、12、24 h发酵液中双歧杆菌、乳酸杆菌、肠杆菌、肠球菌的数量（平板计数法）及发酵液的pH值。 试验结果 （1）低聚木糖对乳杆菌生长的影响 由表1可知，低聚木糖在不同浓度下，对2株乳杆菌生长的增殖促进作用有所不同，对鼠李糖乳杆菌的增殖促进作用明显优于植物乳杆菌；并且对鼠李糖乳杆菌的增殖作用在 1%和2%的浓度下与对照组差异显著（P＜0.05），对植物乳杆菌的增殖作用只1%的浓度下差异显著（P＜0.05）。  （2）低聚木糖对双歧杆菌生长的影响 由表2可知，不同添加量的低聚木糖对3种双歧杆菌生长的促进作用有所不同，对长双歧杆菌和青春双歧杆菌的促进作用在1%的浓度下与对照组差异显著（P＜0.05），0.5%和2%的低聚木糖对其生长无明显影响；而对婴儿双歧杆菌的促进效果皆不明显。  （3）低聚木糖对人体肠道菌群的影响 由表3可知，对大肠杆菌来说，随着发酵时间的延长，对照组与试验组都是先升高后降低；在发酵12 h时，试验组明显低于对照组1和对照组2，且差异极显著（P＜0.01），对照组1与对照组2差异不显著（P＞0.05）；发酵24 h时，试验组明显低于对照组1和对照组2，且差异极显著（P＜0. 01），对照组1低于对照组2，差异显著（P＜0.05）。 由表3可知，对肠球菌来说，随着发酵时间的延长，试验组与对照组皆呈升高的趋势；在发酵6 h和12 h时，对照组2低于对照组1和试验组，且差异显著（P＜0.05）；在发酵24 h时，试验组与对照组1、对照组2都达到了同一个数量级（108 ）上，且差异不显著（P＞0. 05）。 由表3可知，对乳杆菌来说，随着发酵时间的延长，试验组与对照组皆呈上升趋势，在0 h 时，三组皆未检测到乳杆菌；在6 h时，对照组1与试验组的乳杆菌数达到101-102，而对照组2未检测到乳杆菌，并且试验组的乳杆菌数明显高于对照组1和对照组2，与对照组1差异显著（P＜0.05），与对照组2差异极显著（P＜0.01），对照组1与对照组2差异极显著（P＜0. 01）；在12 h时，试验组的活菌数皆高于对照组1和对照组2，但与对照组1差异不显著（P＞0.05），与对照组2差异极显著（P＜0.01），且对照组1与对照组2差异也极显著（P＜0.01）；在24 h 时，试验组与对照组1、对照组2差异均极显著（P＜0.01），对照组1与对照组2差异不显著（P＞0.05）。 由表3可知，对双歧杆菌来说，随着发酵时间的延长，试验组与对照组皆呈上升趋势，在0 h时，试验组与对照组1、对照组2差异不显著（P＞0.05），在6 h时，试验组皆高于对照组，且差异极显著（P＜0.01），但在12 h、24 h，3组之间差异均不显著（P＞0.05）。对 pH值来说：接种肠道菌群后发酵液的初始pH值均较高，随着发酵时间的延长，发酵液的 pH值均呈下降趋势。0-12 h，pH降低较快，至发酵后期pH值变化较平缓。葡萄糖培养基的pH值下降速度最快，最低降至4. 24，其次为低聚木糖组为4.62，不加糖的对照组为 5. 08，培养基pH值的降低是因为细菌代谢多糖产生乳酸和短链脂肪酸所致。
试验结论 1%的低聚木糖对植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、长双歧杆菌和青春双歧杆菌有明显的增殖作用；此外，低聚木糖能促进人体肠道中乳杆菌和双歧杆菌的增殖，抑制大肠杆菌的生长，且对肠球菌无明显的增殖效果，表明低聚木糖对肠道菌群有较好的调节效果。 参考资料： 徐海燕,辛国芹,曹银生,武香玉,汪孟娟,谷巍.低聚木糖对益生菌及人肠道菌群的影响[J].药学研究, 2013, 32(09)：500-503. |
